عنوان : ( کلونینگ ژن F ویروس بیماری نیوکاسل در باکتری Escherichia.Coli )
نویسندگان: فرج اله شهریاری احمدی , محمدرضا باسامی , سیدحسن مرعشی , سیدعلیرضا موسوی ,
چکیده
چکیده بیماری ویروسی نیوکاسل از مهمترینبیماریهای طیور میباشدکه سالیانه خسارات زیادی ایجاد مینماید. با توسعه مهندسی (HN) و هماگلوتنین نورآمینیداز (F) ژنتیک، امروزه از گیاهان برای تولید واکسنهای انسانی و دا می استفاده میشود. ژنهای فیوژن ،E.coli ژنهائی این ویروسهستند که در عفونتزایی و بیماریزایی اهمیت دارند. در اولین اقدا م برای کلونینگاین ژن د ر باکتری تکثیر گردید. PCR آن ساخته شد و سپستوسط واکنش cDNA این ویروسجداسازی، و B از سویه 1 RNA از طریق استخراج F ژن pUC و ناقل 18 F استفاده شد. ژن SacI و EcoRI از هضم آنزیمیتوسطآنزیمهای ،PCR جهتتائید اختصاصی بودن محصول T4 DNA Ligase مورد هضم مضاعفقرار گرفتند. محصولاتهضم مضاعفتوسط آنزیم BamHI و XbaI توسط آنزیمهای برشی ترانسفورم گردید. از پرگنههای سفید که نشان دهنده نوترکیببود ن E.coli به هم متصل گردیدن د و ناقل نوترکیبدر باکتری وجود ژن BamHI و XbaI و SacI و EcoRI باکتری حامل آنها بود استخراج پلاسمید انجام گرفتو توسط هضم با آنزیمهای برشی در داخل پلاسمید تأئید گردید. تکوینکلون باکتری حامل این ژن منبعیپاید ا ر جهت دسترسی بهکلون فیوژن جهت بیان ژن در سیستمهای مختلف از جمله انتقال به گیاه میباشد.