عنوان : ( تأثیر توالی کوزاک در بیان موقت مینی‌ژنی از فاکتور 9 انعقادی در سلولهای پستاندار )
نویسندگان: علی اکبر حداد مشهد ریزه , محمد رضا سام , صدیقه صفری , علیرضا زمردی پور , سید جواد حسینی , فرزانه صابونی ,
Full Textچکیده
زمینه: قابلیت توالی کوزاک در افزایش بیان ژن های یوکاریوتی مشخص شده است. با توجه به این موضوع می توان از این توانمندی در جهت افزایش بیان پروتئین های نوترکیب استفاده کرد. مواد و روش‌ها: با هدف بالا بردن بیان ژن فاکتور IX انعقادی، سازه ای بیانی مجهز به پروموتر سایتومگالو ویروس انسانی (CMV) که بیان یک مینی ژن فاکتور IX را تحت کنترل داشت، به توالی کوزاک تجهیز شد. پس از تأیید صحت سازه نوترکیب، این سازه به همراه یک سازه بیان کننده فاکتور IX فاقد کوزاک (به عنوان کنترل مثبت) و یک پلاسمید pcDNA3 (به عنوان کنترل منفی) برای ترانسفکشن سلول های تخمدان هامستر چینی (CHO) در سه آزمایش مستقل مورد استفاده قرار گرفتند. محیط کشت سلول های ترانسفکت شده به منظور آشکارسازی بیان فاکتور IX انسانی پس از 2 و 3 روز جمع آوری و مورد آزمون یک مرحله ای انعقاد قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج بدست آمده در مقایسه با کنترل منفی بیانگر بیان فاکتور IX فعال توسط دو گروه سلول های ترانسفکت شده با پلاسمیدهای نوترکیب بود. مقایسه ابتدایی میزان بیان دو گروه سلول های ترانسفکت شده با دو سازه نوترکیب، نشانگر افزایش بیان توسط سلول هایی است که حاوی توالی کوزاک هستند. نتیجه گیری: علاوه بر تأیید نقش افزاینده کوزاک بر بیان فاکتور IX، در این طرح با ساخت پلاسمیدهای بیانی ابزار مناسبی برای مطالعه سیستماتیک بیان فاکتور IX انسانی فعال فراهم شد.
کلمات کلیدی
, توالی کوزاک, ژن‌های یوکاریوتی, پروتئین نوترکیب, فاکتور IX,
@article{paperid:1039510,
author = {حداد مشهد ریزه, علی اکبر and محمد رضا سام and صدیقه صفری and علیرضا زمردی پور and سید جواد حسینی and فرزانه صابونی},
title = {تأثیر توالی کوزاک در بیان موقت مینی‌ژنی از فاکتور 9 انعقادی در سلولهای پستاندار},
journal = {طب جنوب},
year = {2009},
volume = {11},
number = {2},
month = {February},
issn = {1735-4374},
pages = {98--107},
numpages = {9},
keywords = {توالی کوزاک، ژن‌های یوکاریوتی، پروتئین نوترکیب، فاکتور IX،},
}
%0 Journal Article
%T تأثیر توالی کوزاک در بیان موقت مینی‌ژنی از فاکتور 9 انعقادی در سلولهای پستاندار
%A حداد مشهد ریزه, علی اکبر
%A محمد رضا سام
%A صدیقه صفری
%A علیرضا زمردی پور
%A سید جواد حسینی
%A فرزانه صابونی
%J طب جنوب
%@ 1735-4374
%D 2009
