عنوان : ( Production of ovine Pancreatic Ribonuclease and investigation of enzyme characteristics )
نویسندگان: مهسا ضابطیان حسینی , محمدرضا نصیری , علی جوادمنش , شاهرخ قوتی ,چکیده
همانطورکه تحقیقات گوناگون نشان دادهاند، در سالهای اخیر، میزان مرگومیر براثرِ سرطان رشد چشمگیری داشته است؛ بههمیندلیل است که محققان درپیِ تولید داروهای جدید، بهویژه داروهایی با اثرات جانبی کمتر، هستند. برهمیناساس، آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند نیز یکی از بهترین اورتولوگها برای آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاو است که آن را در القای مرگ سلولهای سرطانی بهکار میگیرند. آنزیم نخست تنها در 4 اسیدآمینۀ A19S، K37Q، V46F و N103E با آنزیم دوم تفاوت دارد. در مطالعۀ پیشرو، ابتدا شکل سهبعدی آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند پیشبینی و سپس ازنظر پایداری بررسی شده است. درادامه، مشخصات این آنزیم با روشهای بیوانفورماتیکی شبیهسازی و باتوجه به RMSF، RMSD و Gyration analyses میزان پایداری پروتئین نیز پیشبینی گردیده است. همچنین، مطالعات آزمایشگاهی، ازقبیل بررسی فرار این آنزیم از RI، میزان مقاومت آن درمقابل پپسین، غلظت پروتئین تولیدی، قابلیت القای مرگ سلولی در سلولهای سرطانی و نیز میزان فعالیت این آنزیم، انجام گرفته است. این تحقیق نشان میدهد که آنزیم مدنظر پس از 22 ساعت انکوبه در مجاورت پپسین تا 90% دستنخورده باقی میمانَد. میزان غلظت پروتئین تولیدی نیز mg/ml 4.78 بود که با استفاده از روش بردفورد تخمین زده شد. همانطورکه در تحقیقات گذشته نشان داده شده است، انواعِ RNaseA گاو و گوسفند نمیتوانند وارد سلول شوند و درنتیجه هیچگونه سمیت سلولی نشان نمیدهند، ولی، با استفاده از لیپوفکتامین، این آنزیمها وارد سلول شدند و مرگ سلولی را به سلولهای سرطانی Hella القا کردند. میزان زندهمانی سلولها نیز بهروش برادفورد اندازهگیری و فعالیت آنزیم ریبونوکلئاز طبیعی پانکراس گوسفند 558±22 U/mol تخمین زده شد. براساس این تحقیق، معلوم میشود که آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفندی فعالیت آنزیمی و توکسیتی مشابهی با آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاوی دارد و برای استفاده بهعنوان توکسین در تولید ایمونوتوکسینها جانشین مناسبی است.
کلمات کلیدی
, آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند, بیوانفورماتیک, سمیت سلولی, فعالیت زیستی@article{paperid:1084340,
author = {ضابطیان حسینی, مهسا and نصیری, محمدرضا and جوادمنش, علی and شاهرخ قوتی},
title = {Production of ovine Pancreatic Ribonuclease and investigation of enzyme characteristics},
journal = {پژوهشهای علوم دامی ایران},
year = {2021},
volume = {13},
number = {3},
month = {December},
issn = {2008-3106},
pages = {429--440},
numpages = {11},
keywords = {آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند، بیوانفورماتیک، سمیت سلولی، فعالیت زیستی},
}
%0 Journal Article
%T Production of ovine Pancreatic Ribonuclease and investigation of enzyme characteristics
%A ضابطیان حسینی, مهسا
%A نصیری, محمدرضا
%A جوادمنش, علی
%A شاهرخ قوتی
%J پژوهشهای علوم دامی ایران
%@ 2008-3106
%D 2021