عنوان : ( آنالیز In-cell Western، روشی نوین در مطالعات پروتئومیکس سلولی )
نویسندگان: امیر افخمی گلی , شیوا شفیعی ,
Full Textچکیده
تا کنون روشهای مختلفی برای بررسی بیان پروتئینهای سلولی در روی سلولها، بافتها و یا عصاره پروتئینی آنها ابداع شده است. در این پژوهش، روشی جدید برای بررسی بیان پروتئینهای سلولی بر روی سلول های سالم در پلیت های کشت سلولی ارائه شده است. با استفاده از آنتی بادیهای اختصاصی بر علیه بیانگر استرس شبکه اندوپلاسمیک، Grp58 در کشت سلولهای پایه ای نورونی و همینطور نورمالیزه کردن این مقادیر با استفاده از آنتی بادی ضد ایزوتایپ III توبولین (به عنوان پروتئین ساختاری سلولی)، و بدنبال آن استفاده از آنتی بادی های ثانویه مرتبط که به رنگهای مادون قرمز کونژوگه شده اند، میزان نوروتوکسیسیتی دوزهای افزاینده گلوتامات بر روی نورونهای پایه ای جدا شده از قاعده مغز قدامی جنین رت اندازه گیری شده است. همچنین مطالعه حاضر نشان داد که این روش علاوه بر دارا بودن حساسیت بالا و قابلیت اندازه گیری کمی و نیمه کمی، میزان تداخلات فلورسانس زمینه ای پلیت و همینطور اتوفلورسانس سلولی را نیز کاهش می دهد. با استفاده از لیزرها و دتکتورهای فلورسانس مجزا در دو کانال 700 و 800 نانومتر، تکنیک حاضر ما را قادر به بررسی همزمان بیان دو پروتئین مجزا و نورمالیزه کردن بیان Grp58 با توبولین گردانید. با توجه به استفاده گسترده بررسی های بیان پروتئینی در مطالعات سیگنالینگ داخل سلولی و همینطور در مطالعات توکسیکولوژیک و فارماکولوژیک سلولی، می توان از این روش به عنوان تکنیکی بسیار حساستر و دقیقتر نسبت به روشهای قدیمی پروتئومیکس سلولی استفاده کرد.
کلمات کلیدی
, آنالیز In, cell Western
@inproceedings{paperid:1017839,
author = {افخمی گلی, امیر and شیوا شفیعی},
title = {آنالیز In-cell Western، روشی نوین در مطالعات پروتئومیکس سلولی},
booktitle = {اولین کنگره سیتوتکنولوژی و کاربرد های آن},
year = {2008},
location = {ايران},
keywords = {آنالیز In-cell Western},
}
%0 Conference Proceedings
%T آنالیز In-cell Western، روشی نوین در مطالعات پروتئومیکس سلولی
%A افخمی گلی, امیر
%A شیوا شفیعی
%J اولین کنگره سیتوتکنولوژی و کاربرد های آن
%D 2008
