عنوان : ( تأثیر تراکم کشت اولیــه سلولهای تکهستهای جدا شده از مغزاستخـــوان بر جــداسازی سلولهای بنیادی اســب )
نویسندگان: مرتضی زاهدی , عباس پرهام , حسام دهقانی , حسین کاظمی مهرجردی ,چکیده
سلولهای بنیادی مزانشیمی سلولهای چندتوانی هستند که قادرند به انواع سلولهای مزودرمی تمایز یابند. بنابراین جهت درمان اختلالات حرکتی کاربرد دارند. منابع مختلفی برای جداسازی این سلولها در بدن وجود دارد، از جمله مغزاستخوان. تعداد سلولهای بنیادی بدست آمده از مغزاستخوان محدود و برخی اوقات حجم مغزاستخوان بدست آمده نیز اندک است. هدف این مطالعه تعیین بهترین تراکم سلولی در کشت اولیه و تأثیر تراکمهای مختلف کشت اولیه بروی جداسازی موفق سلولهای بنیادی از مغزاستخوان است. بدین منظور، از ۲ اسب نمونه مغزاستخوان اخذ شد، سپس در محیط آزمایشگاه، با محیط کشت حاوی سرم رقیق شده و روی محلول شیب غلظتی قرار گرفت. سپس به مدت ۳۰ دقیقه سانتریفیوژ گردید و بعد از آن لایه سلولهای تکهستهای که در بالای محلول شیب غلظتی قرار داشتند، جمع آوری شده با PBS شسته و با تراکمهای مختلف در فلاسکهای کشت سلول T75 کشت داده شدند (۱۰۵×۱، ۱۰۵×۲، ۱۰۵×۴، ۱۰۵×۸ و ۱۰۶×۱ در هر سانتی متر مربع). سپس بمدت ۲۱ روز بعنوان پاساژ صفر (P0) کشت داده شدند و هر سه روز محیط کشت آنها تعویض شد. در روز ۷ و ۱۴ تعداد کلنیهایی که بیش از ۱۵ عدد سلول شمرده شدند و در روز ۲۱ تعداد سلولهای چسبیده و درصد تقریبی کانفلوئنسی محاسبه گردید. کمترین تعداد کلنی، تعداد سلولهای چسبیده و درصد تقریبی کانفلوئنسی مربوط به نمونهی با حداقل تراکم (۱۰۵×۱) و بیشترین این اعداد مربوط به نمونهی با حداکثر تراکم (۱۰۶×۱) بود. میتوان این نتیجه را گرفت که تراکم بیشترِ کشتِ سلولهای تکهستهای در P0، منجر به بدست آمدن تعداد بیشتری سلول بنیادی مزانشیمی در انتهای این پاساژ میشود و تراکم زیاد اولیه سلولی اثر منفی بر چسبیدن سلولهای بنیادی مزانشیمی به کف فلاسک ندارد. با وجود اینکه با حداقل تراکم (۱۰۵×۱) هم میتوان سلولهای بنیادی را جدا کرد، اما تراکم حداکثر، در مواقعی که مقدار سلولی و حجم نمونه اخذ شده مناسب است توصیه میشود و میتوان از این سلولها برای کاربرد بالینی یا تحقیقاتی استفاده کرد
کلمات کلیدی
, تراکم سلولی, کشت اولیه, سلولهای بنیادی مزانشیمی, اسب, مغزاستخوان@inproceedings{paperid:1034212,
author = {زاهدی, مرتضی and پرهام, عباس and دهقانی, حسام and کاظمی مهرجردی, حسین},
title = {تأثیر تراکم کشت اولیــه سلولهای تکهستهای جدا شده از مغزاستخـــوان بر جــداسازی سلولهای بنیادی اســب},
booktitle = {دومین کنگره ملی بهداشت و بیماری های اسب},
year = {2013},
location = {شیراز, ايران},
keywords = {تراکم سلولی، کشت اولیه، سلولهای بنیادی مزانشیمی، اسب، مغزاستخوان},
}
%0 Conference Proceedings
%T تأثیر تراکم کشت اولیــه سلولهای تکهستهای جدا شده از مغزاستخـــوان بر جــداسازی سلولهای بنیادی اســب
%A زاهدی, مرتضی
%A پرهام, عباس
%A دهقانی, حسام
%A کاظمی مهرجردی, حسین
%J دومین کنگره ملی بهداشت و بیماری های اسب
%D 2013