پروتئازها مهم‌ترین آنزیم‏های صنعتی محسوب می‌شوند که کاربردهای مختلفی دارند. میکروارگانیسم‏های متعددی قادرندآنزیم پروتئاز را تولید نمایند. اما در این میان باسیلوس‏ها بیش‏تر از سایر باکتری‏ها مورد توجه قرار گرفته‏اند. در این مطالعه از فلور میکروبی چشمه آبگرم \\\\\\\"دیگ رستم\\\\\\\" سویه‏ای از باسیلوس به نامBacillus subtilis DR8806 شناسایی شد که دارای فعالیت پروتئازی است. پس از بهینه سازی شرایط رشد، باکتری به مدت 30 ساعت در محیط اختصاصی رشد داده شد. محتویات محیط کشت با سولفات آمونیوم 85% رسوب داده شد، سپس با سانتریفوژ رسوبات حاصل جمع آوری و درکمترین حجم از بافر سدیم فسفات 20 میلی مولار با 5 /6 حل شد. عصاره حاصل سپس به کیسه دیالیز منتقل شد و به مدت 24 ساعت دیالیز شد. در نهایت به کمک کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون متعادل شده با بافر سدیم فسفات 20 میلی مولار با 5 /6pH= فرکشن‏های متصل شده که فعالیت پروتئازی داشتند جمع‏آوری شدند. مطالعات بیوشیمیایی نشان داد، این آنزیم دارای وزن مولکولی 37 کیلو دالتون و pH بهینه 5/7 است. مطالعه الگوی SDS-PAGE نشان می‏دهد که پروتئاز جدا شده خالص است. نتایج زایموگرام نیز این امر را تایید می‏کند.

کلمات کلیدی