عنوان : ( ارزﻳﺎﺑﻲ ﭼﻨﺪ رﻗﻢ ﺗﻮﺗﻮن ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﻴﺰﺑﺎن ﺑﻴﺎن ﻣﻮﻗﺖ ﺑﺮ ﭘﺎﻳﻪ اﮔﺮوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم )
نویسندگان: مرجان بحرآبادی , فرهاد شکوهی فر , محمدعلی ابراهیمی ,چکیده
ﺑﻴﺎن ﻣﻮﻗﺖ ﺑﺮ ﭘﺎﻳﻪ اﮔﺮوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑﻪ دﻟﻴﻞ ﺳﺎدﮔﻲ و ﺳﺮﻋﺖ ﺑﺎﻻ در ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت آﻧﺎﻟﻴﺰ ﻋﻤﻠﻜﺮد ﻣﻮرد ﺗﻮﺟﻪ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺘﻪ اﺳﺖ. ﻣﻮﻓﻘﻴﺖ اﻳﻦ روش ﺑﻪ ﭼﮕﻮﻧﮕﻲ ﺑﺮﻫﻤﻜﻨﺶ ﺳﻮﻳﻪ ﺑﺎﻛﺘﺮی و رﻗﻢ ﮔﻴﺎه ﺑﺴﺘﮕﻲ دارد. در اﻳﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﭼﻬﺎر ژﻧﻮﺗﻴﭗ ﺗﻮﺗﻮن ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﻴﺰﺑﺎن ﻫﺎی ﺑﻴﺎن ﻣﻮﻗﺖ در ﭘﺎﺳﺦ ﺑﻪ ﺳﻮﻳﻪ GV3101 اﮔﺮوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﻣﻮرد ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ. ﻧﺎﻗﻞ pGCGi ﺣﺎوی ژن ﮔﺰارﺷﮕﺮ ﺑﺘﺎﮔﻠﻮﻛﺮوﻧﻴﺪاز اﻳﻨﺘﺮوﻧﺪار ﺗﺤﺖ ﻛﻨﺘﺮل ﭘﺮوﻣﻮﺗﺮ CaMV35S ﺟﻬﺖ ﺑﺮرﺳﻲ ﺑﻴﺎن ﻳﻮﻛﺎرﻳﻮﺗﻲ و ﻧﺎﻗﻞ pBI121 ﺑﻌﻨﻮان ﻛﻨﺘﺮل ﺑﻴﺎن ﭘﺮوﻛﺎرﻳﻮﺗﻲ ﺑﻪ ﻛﺎر ﮔﺮﻓﺘﻪ ﺷﺪ. ﺟﻬﺖ ﺑﻴﺎن ﻣﻮﻗﺖ ژن ﮔﺰارﺷﮕﺮ از روش ﺗﺰرﻳﻖ ﺳﻠﻮل ﻫﺎی اﮔﺮوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑﻪ ﺑﺎﻓﺖ ﺑﺮگ ﺗﻮﺗﻮن ﻳﺎ اﮔﺮواﻳﻨﺠﻜﺸﻦ ﺑﺮگ اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ. دﻳﺴﻚ ﻫﺎی ﺑﺮﮔﻲ از ﻣﻨﻄﻘﻪ ﻧﻔﻮذ ﺑﺎﻛﺘﺮی، 48 ﺳﺎﻋﺖ ﭘﺲ از ﺗﺰرﻳﻖ ﺟﻬﺖ ﺳﻨﺠﺶ ﻫﻴﺴﺘﻮﺷﻴﻤﻴﺎﺋﻲ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ آﻧﺰﻳﻢ ﺑﺘﺎﮔﻠﻮﻛﺮوﻧﻴﺪاز ﺟﺪاﺳﺎزی ﺷﺪ. ﻧﺘﺎﻳﺞ ﻧﺸﺎن داد ﺳﻮﻳﻪ GV3101 در ﻣﻴﺎن ژﻧﻮﺗﻴﭗ ﻫﺎی ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳﻲ، ژن ﺑﺘﺎﮔﻠﻮﻛﺮوﻧﻴﺪاز اﻳﻨﺘﺮوﻧﺪار را در دو ﮔﻴﺎه Nicotiana benthamiana و Nicotiana tabacum var. Samsun ﺑﻴﺎن ﻣﻲ ﻧﻤﺎﻳﺪ. ﺑﺮ اﺳﺎس اﻳﻦ ﻧﺘﺎﻳﺞ دو ژﻧﻮﺗﻴﭗ ﻣﻨﺎﺳﺐ ﺟﻬﺖ اﻧﺠﺎم ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت ﺑﻴﺎن ﻣﻮﻗﺖ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﺳﻮﻳﻪ GV3101 اﻧﺘﺨﺎب ﺷﺪ.