لپتین یک هورمون پروتئینی با وزن مولکولی 16 کیلودالتون است که به طور عمده از بافت چربی سنتز شده و در فعالیت های فیزیولوژیک مختلفی از فبیل تنظیم اشتها، متابولیسم و تولیدمثل دخیل است. علاوه بر این، یافته های اخیر حاکی از آن است که لپتین می تواند در فیزیولوژی تنفس نیز موثر باشد. از آنجایی که اختلافات فیزیولوژیک بین گونه ای وجود دارد و پی بردن به نقش هر فاکتوری از جمله لپتین مستلزم شناسایی بافت(های) هدف آن و در حقیقت گیرنده(های) آن می‌باشد لذا در این مطالعه بیان رونوشت (mRNA) گیرنده عملکردی لپتین در ریه گوسفند با روش رونوشت برداری معکوس و واکنش زنجیره ای پلیمراز (RT-PCR) مورد بررسی قرار گرفت. نمونه بافت ریه در کشتارگاه تهیه و در کنار یخ به آزمایشگاه منتقل گردید و تا زمان استخراج RNA در فریزر ˚C 80- نگهداری گردید. سپس با استفاده از محلول TriPure، RNA نمونه استخراج شد و آلودگی احتمالی DNA با استفاده از آنزیم DNase-RNase free حذف گردید و به دنبال آن cDNA ساخته شد. با استفاده از cDNAهای به دست آمده و پرایمرهای اختصاصی طراحی شده واکنش PCR انجام شد. الکتروفورز محصولات نهایی واکنش RT-PCR، نشانگر تکثیر قطعه مورد انتظار مربوط به cDNA گیرنده عملکردی لپتین (Ob-Rb) در بافت ریه گوسفند بود. ژن بتااکتین نیز به عنوان کنترل مثبت داخلی مورد استفاده قرار گرفت و با توجه به اینکه پرایمر این ژن بر روی دو اگزون طراحی شده بود لذا تنها بیان قطعه مربوط به cDNA (و نه قطعه DNA) بیانگر هم درستی واکنش‌ها و هم تایید عدم آلودگی به DNA بود. لذا نتایج این مطالعه مشخص نمود بافت ریه یکی از بافت‌های هدف لپتین است و این نکته بایستی در مطالعات پایه ای و کاربردی مرتبط با لپتین در فیزیولوژی تنفس گوسفند مدنظر قرار گیرد.

کلمات کلیدی